Amonyak Tayininde Glutamat Dehidrogenaz Kullanımı

Glutamat Dehidrogenaz (GDH) Reaksiyonu

Glutamat dehidrogenaz, glutamat ↔ α-ketoglutarat + NH₃ dönüşümünü katalizler.

  • Reaksiyon: Glutamat+NAD(P)+    ↔    α-ketoglutarat+NH3+NAD(P)H+H+Glutamat + NAD(P)^+ \;\; \leftrightarrow \;\; α\text{-ketoglutarat} + NH₃ + NAD(P)H + H^+Glutamat+NAD(P)+↔α-ketoglutarat+NH3​+NAD(P)H+H+

Amonyak Tayini (Laboratuvar Yöntemi)

  • Prensip: Serbest NH₃, GDH aracılığıyla α-ketoglutarat + NADPH → glutamat + NADP⁺ reaksiyonuna girer.
  • Bu sırada NADPH tüketilir (absorbsiyonu 340 nm’de azalır).
  • Spektrofotometrik olarak NADPH’in azalması ölçülür → ortamdaki amonyak (NH₃/NH₄⁺) miktarı hesaplanır.

Yani amonyak tayini GDH ile indirekt olarak, NADPH’in 340 nm’deki absorbans değişimi üzerinden yapılır.

Klinik Önemi

  • Serum amonyak tayini →
    • Hepatik ensefalopati
    • Üre döngüsü bozuklukları
    • Karaciğer yetmezliği
    • Hiperammonemi tanısı için kullanılır.
  • GDH yöntemi günümüzde amonyak ölçümünde en sık kullanılan enzimatik yöntemlerden biridir.

Özet:

  • Glutamat dehidrogenaz, amonyak tayininde kullanılır.
  • NH₃ varlığında NADPH tüketilir → absorbans düşüşü ölçülerek amonyak konsantrasyonu hesaplanır.