Mupirosin; izolösil tRNA sentetaz inhibitörüdür. Psödomonik asit (mupirosin), bakterilerde izolösin-tRNA ligazını inhibe eder , bu da izolösil-tRNA’nın tükenmesine ve karşılık gelen yüklenmemiş tRNA’nın birikmesine yol açar . İzolösil-tRNA’nın tükenmesi, protein sentezinin inhibisyonuna neden olur. tRNA’nın yüklenmemiş formu, ribozomların aminoasil-tRNA bağlanma bölgesine bağlanarak (p)ppGpp oluşumunu tetikler ve bu da RNA sentezini inhibe eder. Protein sentezi ve RNA sentezinin birleşik inhibisyonu bakteriyostazla sonuçlanır. Bu etki mekanizması , izolösinin bir analoğu olan furanomisin ile paylaşılır.